怎么用分光光度計制作標準曲線_制作標準曲線有什么意義

　　標準曲線的定義

　　標準曲線是指通過測定一系列已知組分的標準物質的某理化性質，從而得到該性質的數值所組成的曲線。標準曲線是標準物質的物理/化學屬性跟儀器響應之間的函數關系。

　　在分析化學實驗中，常用標準曲線法進行定量分析，通常情況下的標準工作曲線是一條直線。與校正曲線不同，它是以標準溶液及介質組成的標準系列，標繪出來的曲線。校正曲線的標準系列的伴生組分必須與試樣相匹配，以便測量結果的準確。只有標準曲線與校正曲線相重合的條件下，才可以用標準曲線來代替校正曲線。

　　標準曲線應用

　　實用性，這是做標準曲線的重要前提；這個問題實際很簡單：樣品的儀器響應能否用標準曲線來推導其理化屬性？答案建立在儀器響應的特異性和標準系列和樣品的匹配性上面。一方面科學研究總是力求儀器的響應對于標準和樣品是一視同仁；同時也要求樣本跟標準基體匹配。這樣，可以理解大多數分析要求標準曲線和樣品同批測定（除非經過實驗，標準曲線的變化不大），也可以理解在做大批量檢測的時候要插入QC檢驗樣本，以考察儀器的穩定性。

　　現有方法趨向于標準曲線適用于較寬的樣品濃度范圍。在較寬的濃度跨度和有限的標準點的情況下，均勻的分布濃度點是最佳選擇，這樣對該標準曲線覆蓋的濃度范圍內，對于所有的濃度所提供的信息量都是相同的。奇數點的設置來源于已知信息，先確定濃度的范圍，在該濃度范圍先確定中間點，然后在中間點左右分布對稱的標準曲線點，所以出來的總是奇數個點。

　　分光光度計制作標準曲線步驟方法

　　1、配制相應的標準系列；

　　2、以空白為參比（或水）測得系列吸光度；

　　3、以標準溶液的吸光度為縱坐標，對應的標準溶液的含量為橫坐標，找出相對的點；

　　4、將點用一條直線連接起來；盡量將點都落在線上；（繪制標準曲線；）

　　5、由此根據測得的樣品的吸光度查找相對的含量；

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　　分光光度法制作標準曲線的影響因素

　　標準曲線是直接用標準溶液制作的曲線，是用來描述被測物質的濃度（或含量）在分析儀器響應信號值之間定量關系的曲線。在分光光度法分析中，被測物質的濃度在儀器上的響應信號值在一定范圍內呈直線關系，水樣測定的結果可以從標準曲線上查出。因此標準曲線制作的好壞，將會影響測定結果的準確度。

　　1、標準曲線的表達式標準曲線應是一條通過原點的直線，如果坐標上各濃度點基本在一條直線上可不進行回歸處理，但在實驗中不可避免地存在測定誤差，往往會有一、二點偏離直線，此時可用最小二乘法進行回歸分析，然后繪制曲線，通常稱為回歸直線，而代表回歸直線方程叫回歸方程，表達式為：y=bx+a（式中：b為直線斜率，a為y軸上的截距，x為被測溶液的濃度，y為吸光度，是多次測定結果的平均值）。

　　在實際工作中，制作標準曲線的目的，是要借助它來查出水樣中被測物質的濃度，而不是由x值通過回歸方程去求得最可靠的y值，為了便于將觀察到儀器響應信號值代入回歸方程中直接計算試樣的濃度或含量，勿需去繪制標準曲線再從曲線上查出被測物的濃度，改用下式計算;x=by+a（式中：a為x軸線上的截距，其它解釋同前）。

　　2、標準曲線的參數標準曲線有3個參數，即相關系數r，斜率b

　　分光光度計制作標準曲線的意義

　　以某一特定波長條件下由分光光度計分別測出一系列不同溶度標準溶液然的吸光度值，以吸光光度值為縱坐標，相應的溶液濃度為橫坐標，在坐標紙上可作出一條吸光度與濃度成正比通過原點的直線，稱作標準曲線。繪制標準曲線的實用意義就是只要測得其吸光度值即可在標準曲線上查出相應的濃度值。